โครงสร้างของเอ็มบริโอไก่และวิธีการติดเชื้อ การเพาะเลี้ยงไวรัสในตัวอ่อนไก่ กระบวนการทำงานร่วมกันระหว่างฟาจที่มีฤทธิ์รุนแรงและเซลล์แบคทีเรียที่ไวต่อพวกมัน

สวัสดีตอนบ่ายผู้อ่านที่รัก! วันนี้เราจะให้คำอธิบาย แสดงภาพถ่ายและวิดีโอเกี่ยวกับพัฒนาการของไก่ในไข่ในแต่ละวันระหว่างการฟักที่บ้านและในฟาร์มสัตว์ปีก มีการปฏิบัติอย่างมั่นใจทั้งในระดับโรงงานและในฟาร์มส่วนตัว

แต่ถึงแม้จะมีการใช้อย่างแพร่หลาย แต่ก็มีเพียงไม่กี่คนที่คิดถึงกลไกที่ซับซ้อนซึ่งมีอยู่ในระดับพันธุกรรมที่ช่วยให้มั่นใจในการเจริญเติบโตและพัฒนาการของไก่

ยังคงมีความเห็นว่าลูกไก่เติบโตจากไข่แดง ในบทความนี้คุณจะได้เรียนรู้ความลับทั้งหมดที่ซ่อนอยู่และความหมาย "แย่มาก" ที่ซ่อนอยู่ภายใต้คำว่า allantois ในไก่และน้ำคร่ำในไก่และสิ่งที่พวกเขาทำหน้าที่

พัฒนาการของไก่ในไข่ในแต่ละวัน

บลาสโตดิสก์

พัฒนาการของลูกไก่เริ่มต้นด้วยบลาสโตดิสก์ Blasodisk เป็นก้อนเล็ก ๆ ของไซโตพลาสซึมที่อยู่บนพื้นผิวของไข่แดง ที่ตำแหน่งของบลาสโตดิสก์ ความหนาแน่นของไข่แดงจะต่ำกว่ามาก ซึ่งส่งผลให้ไข่แดงลอยอยู่ตลอดเวลาโดยให้บลาสโตดิสก์ขึ้นด้านบน

คุณสมบัตินี้ให้ความร้อนที่ดีขึ้นในระหว่างกระบวนการฟักไข่ บลาสโตดิสที่ปฏิสนธิจะเริ่มแบ่งตัวในขณะที่ยังอยู่ในตัวของไก่ และเมื่อถึงเวลาที่วาง มันก็จะถูกล้อมรอบด้วยบลาสโตเดิร์มโดยสมบูรณ์แล้ว บลาสโตดิสก์มีลักษณะเป็นจุดสีขาวเล็กๆ ขนาดประมาณ 2 มม.

รัศมีแสงที่ล้อมรอบจานเชื้อโรคในวงแหวนคือบลาสโตเดิร์ม

เมื่อไข่เข้าสู่สภาพแวดล้อมที่เหมาะสมและหยุดลงหลังจากวางไข่ การแบ่งเซลล์จะดำเนินต่อไป

คุณควรรู้:ตรงกันข้ามกับความเชื่อที่นิยมว่าการฟักไข่สามารถทำได้ตั้งแต่วันที่ 6 ของการฟักตัวเท่านั้น การพัฒนาของบลาสโตเดิร์มจะมองเห็นได้ชัดเจนหลังจาก 18-24 ชั่วโมงนับจากเริ่มฟักตัว เมื่อถึงจุดนี้ จะมองเห็นความมืดมิดได้ชัดเจนขนาดเส้นผ่านศูนย์กลาง 5–6 มม. และเคลื่อนตัวได้ง่ายเมื่อพลิกไข่

ในวันที่ 2-3 ของการฟักตัว การพัฒนาของเยื่อหุ้มเซลล์ชั่วคราวจะเริ่มขึ้น:

  1. แอมเนียนในไก่
  2. Allantois ในไก่

แท้จริงแล้วทั้งหมดนี้เป็นอวัยวะชั่วคราวที่ออกแบบมาเพื่อทำหน้าที่รับรองกิจกรรมสำคัญของเอ็มบริโอจนกระทั่งถึงการก่อตัวขั้นสุดท้าย

แอมเนียนในไก่

เป็นเมมเบรนที่ช่วยปกป้องตัวอ่อนจาก ผลกระทบทางกายภาพและการทำให้แห้งเนื่องจากการเติมของเหลว น้ำคร่ำของลูกไก่ควบคุมปริมาณของเหลวโดยขึ้นอยู่กับอายุของตัวอ่อน

พื้นผิวเยื่อบุผิวของถุงน้ำคร่ำสามารถเติมน้ำลงในโพรงของตัวอ่อนได้และยังช่วยให้ของเหลวไหลออกเมื่อโตขึ้น

Allantois ในไก่

อวัยวะชั่วคราวชนิดหนึ่งที่ทำหน้าที่หลายอย่าง:

  • การจัดหาออกซิเจนให้กับตัวอ่อน
  • แยกของเสียออกจากตัวอ่อน
  • มีส่วนร่วมในการขนส่งของเหลวและ สารอาหาร;
  • ดำเนินการส่งแร่ธาตุและแคลเซียมจากเปลือกไปยังตัวอ่อน

ในระหว่างกระบวนการเจริญเติบโตของลูกไก่ Allantois จะสร้างเครือข่ายหลอดเลือดที่แตกแขนงซึ่งเรียงเป็นแนวบนพื้นผิวด้านในทั้งหมดของไข่และเชื่อมต่อกับลูกไก่ผ่านสายสะดือ

ไก่หายใจอยู่ในไข่

การแลกเปลี่ยนออกซิเจนในไข่ ขึ้นอยู่กับระยะการพัฒนาของไก่ มีกลไกที่แตกต่างกัน ในระยะเริ่มแรกของการพัฒนา ออกซิเจนจะมาจากไข่แดงโดยตรงไปยังเซลล์บลาสโตเดิร์ม

เมื่อระบบไหลเวียนโลหิตมาถึง ออกซิเจนจะเข้าสู่กระแสเลือดแม้จะมาจากไข่แดงก็ตาม แต่ไข่แดงไม่สามารถรับประกันการหายใจของสิ่งมีชีวิตที่กำลังเติบโตอย่างรวดเร็วได้อย่างเต็มที่

ตั้งแต่วันที่ 6 เป็นต้นไป หน้าที่ในการให้ออกซิเจนจะค่อยๆ ถ่ายโอนไปยังอัลลันตัวส์ การเจริญเติบโตของมันเริ่มต้นไปทางช่องอากาศของไข่และเมื่อไปถึงแล้วจะครอบคลุมพื้นที่ภายในของเปลือกที่ใหญ่ขึ้นเรื่อย ๆ ยิ่งลูกไก่โตขึ้น พื้นที่ที่อัลลันตัวส์ก็ครอบคลุมมากขึ้นเท่านั้น

เมื่อส่องกล้องจะมีลักษณะเป็นตาข่ายสีชมพู ปกคลุมไข่ทั้งหมดและปิดด้านที่แหลมคม

โภชนาการไก่ในไข่

ในวันแรกของการพัฒนา เอ็มบริโอจะใช้สารอาหารจากโปรตีนและไข่แดง เนื่องจากไข่แดงประกอบด้วยแร่ธาตุ ไขมัน และคาร์โบไฮเดรตที่ซับซ้อน จึงสามารถตอบสนองความต้องการเริ่มแรกของร่างกายที่กำลังเติบโตได้

หลังจากปิดอัลลันตัวส์ (วันที่ 11 ของการพัฒนา) การกระจายฟังก์ชันจะเกิดขึ้น เอ็มบริโอจะมีขนาดใหญ่ขึ้นและจะอยู่ตามแนวแกนยาวของไข่ โดยให้ส่วนหัวหันไปทางปลายทื่อ โปรตีน ณ จุดนี้ จะเข้มข้นอยู่ที่ปลายแหลมของไข่

น้ำหนักของลูกไก่ประกอบกับแรงกดของอัลลันตัวส์ช่วยให้โปรตีนมีการเคลื่อนตัวและการซึมผ่านของน้ำคร่ำเข้าไปในปากของเอ็มบริโอ กระบวนการที่ต่อเนื่องนี้ช่วยให้ลูกไก่เติบโตและพัฒนาการอย่างรวดเร็วในแต่ละวันระหว่างการฟักไข่

ตั้งแต่ 13 วัน แร่ธาตุซึ่งไก่ใช้ในการพัฒนาต่อไป จะถูกส่งโดยอัลลันตัวส์จากเปลือก

คุณควรรู้: โภชนาการไก่ปกติสามารถให้ได้โดยอัลลันตัวส์ที่ปิดสนิทในไก่เท่านั้น หากปิดฝาแล้วปลายแหลมของไข่ยังมีโปรตีนที่ไม่หุ้มภาชนะ ไก่ก็จะมีสารอาหารไม่เพียงพอสำหรับการเจริญเติบโตต่อไป

ตำแหน่งไข่และพัฒนาการของลูกไก่

ใน เมื่อเร็วๆ นี้มีการฝึกฝนการฟักตัวมากขึ้น ไข่ไก่ในตำแหน่งแนวตั้ง แต่วิธีนี้ไม่ได้ส่งผลดีที่สุดต่อพัฒนาการของไก่

ในตำแหน่งแนวตั้ง ความเอียงสูงสุดเมื่อหมุนคือ 45° ความโน้มเอียงนี้ไม่เพียงพอสำหรับการเจริญเติบโตตามปกติของอัลลันตัวส์และการปิดตัวทันเวลา โดยเฉพาะอย่างยิ่งสำหรับไข่ขนาดใหญ่

เมื่อฟักในแนวนอน จะมีการหมุน 180° ซึ่งส่งผลดีต่อการเจริญเติบโตของอัลลันตัวส์ และผลที่ตามมาคือโภชนาการของลูกไก่

ตามกฎแล้ว ขนปุยที่ฟักโดยวางไข่ในแนวตั้งจะมีน้ำหนักน้อยกว่าขนที่ฟักโดยวางไข่ในแนวนอนถึง 10%

ความสำคัญของการกลับไข่ต่อพัฒนาการของลูกไก่

การพลิกไข่ระหว่างการฟักไข่เป็นสิ่งจำเป็นในทุกขั้นตอนของการพัฒนา ยกเว้นวันแรกและสองวันแรกสุดท้าย ในวันแรกจำเป็นต้องมีการให้ความร้อนอย่างเข้มข้นกับบลาสโตดิสก์และในวันสุดท้ายเสียงแหลมเล็ก ๆ ได้เข้ามาอยู่ในตำแหน่งที่จะทะลุผ่านเปลือกแล้ว

ในช่วงแรกของการพัฒนา การเปลี่ยนไข่จะช่วยลดความเสี่ยงที่บลาสโตเดิร์มหรือแอมเนียนจะเกาะติดอยู่ด้านในของเปลือก

การหมุนยังช่วย:

  • การลดลงของน้ำคร่ำ;
  • ความร้อนสม่ำเสมอของไข่
  • การรับตำแหน่งที่ถูกต้องโดยตัวอ่อน
  • ปรับปรุงการแลกเปลี่ยนก๊าซ
  • การปิดอัลลันตัวส์ทันเวลา;
  • ปรับปรุงโภชนาการของทารกในครรภ์

หลังจากอ่านบทความแล้วเราสามารถตัดสินความซับซ้อนของกระบวนการที่เกิดขึ้นกับกระทงหรือไก่ตัวเล็กในระหว่างการพัฒนาจากหลายเซลล์ไปจนถึงนกตัวเล็ก กระบวนการนี้ไม่ซับซ้อนไม่น้อยไปกว่าพัฒนาการของมนุษย์หรือลูกแมวในครรภ์ ซึ่งรับประกันสภาวะคงที่

การพัฒนาลูกไก่ในไข่ในแต่ละวันนั้นขึ้นอยู่กับสภาพภายนอกโดยสมบูรณ์ซึ่งมีการฟักตัว

เราหวังว่าทุกคนจะฟักไข่ขนปุยสีเหลือง สีเทา และขนอื่นๆ ได้สำเร็จ!

สมัครรับข้อมูลอัปเดตเว็บไซต์เพื่อเป็นคนแรกที่รู้ข่าวไก่ที่จะช่วยแก้ปัญหาทั้งหมดของคุณ

นี่คือภาพถ่ายจากผู้อ่านประจำของเรา Yulia Arepteva ไก่ฟักอยู่ใต้!

ในความคิดเห็น คุณสามารถเพิ่มรูปภาพไก่ไข่ ไก่โต้ง และลูกไก่ได้! หรือสัตว์ปีกชนิดอื่นๆ เราอยากรู้ว่าคุณมีเล้าไก่แบบไหน?
คุณชอบบทความนี้หรือไม่? แบ่งปันกับเพื่อน ๆ บนเครือข่ายโซเชียล:

เข้าร่วมกับเราบน VKontakte อ่านเกี่ยวกับไก่!

สิ่งสำคัญอย่างยิ่งในการพัฒนาไวรัสวิทยาคือการแนะนำวิธีการเพาะเลี้ยงไวรัส ตัวอ่อนไก่- สำหรับการแพร่พันธุ์ของไวรัสจะใช้ตัวอ่อนไก่อายุ 7-12 วันฟักในเทอร์โมสตัทที่อุณหภูมิ 37 C เงื่อนไขที่จำเป็นสำหรับการพัฒนาตัวอ่อนอย่างเหมาะสมคือการรักษาความชื้นในอากาศไว้ซึ่งสามารถสร้างได้โดยการวาง ภาชนะที่มีน้ำอยู่ในเทอร์โมสตัท การเพาะเลี้ยงไวรัสในเอ็มบริโอไก่จะดำเนินการในสถานที่ต่าง ๆ ของเอ็มบริโอที่ติดเชื้อ:

1) บนเยื่อหุ้มเซลล์ choion-allantoic;

2) เข้าไปในโพรงอัลลันโทอิก;

3) เข้าไปในโพรงน้ำคร่ำ;

4) ลงในถุงไข่แดง

การติดเชื้อของตัวอ่อนไก่จะดำเนินการในกล่องโดยใช้เครื่องมือที่ปลอดเชื้อ ก่อน: การติดเชื้อ เช็ดตัวอ่อนไก่สองครั้งด้วยสำลีชุบแอลกอฮอล์

การติดเชื้อของเยื่อหุ้มคอรีออน-อัลลานโตอิก. หลังจากการฆ่าเชื้อไข่แล้ว ให้ตัดเปลือกบางส่วนออกจากปลายทู่อย่างระมัดระวัง แล้วเอาเยื่อหุ้มชั้นย่อยออก ซึ่งเผยให้เห็นเยื่อหุ้มคอรีออน-อัลลาติโออิก วัสดุติดเชื้อในปริมาณ 0.1-0.2 มิลลิลิตรถูกนำไปใช้กับเมมเบรน choion-allantoic โดยใช้เข็มฉีดยาหรือปิเปตปาสเตอร์ หลังการติดเชื้อ หลุมจะถูกปิดด้วยฝาปิด และช่องว่างระหว่างมันกับเอ็มบริโอไก่จะเต็มไปด้วยพาราฟิน อีกด้านหนึ่งของไข่ ให้เขียนชื่อวัสดุที่ติดเชื้อและวันที่ติดเชื้อด้วยดินสอธรรมดา

การติดเชื้อในช่องน้ำคร่ำไข่เป็นแบบส่องกล้อง และเลือกบริเวณด้านข้างซึ่งคอรีออน-อัลลันตัวส์ไม่มีเส้นเลือดขนาดใหญ่ บริเวณนี้ถูกทำเครื่องหมายด้วยดินสอ ไข่จะถูกวางบนขาตั้งในแนวนอน ฆ่าเชื้อ และเจาะรูด้วยหอกฆ่าเชื้อแบบพิเศษ และเปลือกมีความลึก 2-3 มม. โดยแทงเข็มที่มีวัสดุติดเชื้อในระยะห่างเดียวกันเข้าไปในโพรงน้ำคร่ำโดยตรง เพื่อป้องกันไม่ให้ของเหลวที่ฉีดไหลย้อนกลับ จะต้องเจาะเหนือถุงลมก่อน หลังจากนั้นทั้งสองหลุมจะเต็มไปด้วยพาราฟิน

การติดเชื้อในช่องอัลลันโทอิกการติดเชื้อจะดำเนินการในกล่องสีเทาด้วย ช่องอากาศถูกทำเครื่องหมายไว้ เปลือกเหนือช่องอากาศจะถูกฆ่าเชื้อ และเข็มฉีดยาที่มีวัสดุสอดเข้าไปในรูในเปลือกเข้าหาตัวอ่อน หากเข็มเข้าไปในโพรงอัลลันโทอิก จะสังเกตการกระจัดของเงาของตัวอ่อน หลังการติดเชื้อ รูจะเต็มไปด้วยพาราฟิน

การติดเชื้อในถุงไข่แดงเปลือกถูกฆ่าเชื้อ วางไข่ไว้บนขาตั้งโดยให้ปลายทู่ไปทางขวาโดยให้เครื่องหมายไข่แดงหงายขึ้น เจาะรูตรงกลางเหนือช่องอากาศ เข็มฉีดยาถูกสอดเข้าไปในรูในเปลือกในแนวนอนที่ความลึก 2-3 มม. ซึ่งเข้าไปในถุงไข่แดง วัสดุถูกบริหารในปริมาตร 0.2-0.3 มล. หลังจากแนะนำวัสดุแล้ว รูจะถูกแว็กซ์

ขึ้นอยู่กับอุณหภูมิและระยะเวลาฟักตัว คุณสมบัติทางชีวภาพของไวรัสตัวนี้ ไข่ที่ติดเชื้อจะถูกตรวจสอบทุกวันและทำการส่องไข่เพื่อตรวจสอบความมีชีวิตของเอ็มบริโอ หากเอ็มบริโอตายในวันแรก สาเหตุมักเกิดจากการบาดเจ็บระหว่างการติดเชื้อ ไข่ดังกล่าวฟักออกมาจากประสบการณ์ การมีอยู่ของไวรัสในเอ็มบริโอที่ติดเชื้อนั้นพิจารณาจากการเปลี่ยนแปลงลักษณะเฉพาะในเยื่อหุ้มเซลล์คอรีออน-อัลลานโตอิกของเอ็มบริโอไก่ที่ติดเชื้อ ตรวจพบไวรัสที่ไม่มีกิจกรรมการสร้างเม็ดเลือดแดงโดยใช้ RSC เพื่อตรวจหาไวรัสในน้ำอัลลันโทอิกหรือน้ำคร่ำของเอ็มบริโอที่ติดเชื้อ จะดำเนินการ RGA

  • ที่สาม วิธีการล้างพิษทางกายภาพและเคมีเทียม
  • ที่สาม วิธีที่มีแนวโน้มในการรักษาโรคเบาหวานที่ต้องพึ่งอินซูลิน
  • การติดเชื้อของเยื่อหุ้ม chorioallantoicวิธีนี้เป็นวิธีหนึ่งที่ใช้บ่อยที่สุด ข้อได้เปรียบหลักของมันคือไวรัสจำนวนหนึ่งเมื่อเพิ่มจำนวนบนเยื่อหุ้มเซลล์ chorioallantoic จะทำให้เกิดการเปลี่ยนแปลงลักษณะโดยก่อให้เกิดรอยโรคในรูปแบบของแผ่นจุดสีขาวที่มีสัณฐานวิทยาต่างๆ

    ตัวอ่อนอายุ 10-12 วันใช้สำหรับการติดเชื้อ โดยทั่วไปแล้ว เยื่อหุ้มเซลล์ chorioallantoic จะถูกเจาะโดยการเจาะรูในเปลือกเหนือถุงลมหรือที่ด้านข้างของไข่

    ขั้นตอนหลักของการติดเชื้อบนเยื่อหุ้ม chorioallantoic จากช่องอากาศ:

    1. วางไข่ไว้บนขาตั้งในแนวตั้ง
    โดยให้ถุงลมนิรภัยอยู่ด้านบน)" ดำเนินการ
    การฆ่าเชื้อบริเวณเปลือกไข่ที่ปลายทู่อย่างทั่วถึง

    2. เปลือกถูกเจาะเหนือศูนย์กลางของถุงลม
    โดยใช้เข็มผ่า

    3. ใส่กรามของกรรไกรเข้าไปในรูที่เกิดและ
    ตัดหน้าต่างในเปลือกเส้นผ่านศูนย์กลางประมาณ 1.5 ซม. (ในขณะเดียวกัน
    อย่าให้เศษเปลือกเข้าไปในไข่)

    4. เมื่อผ่านรูที่ทำไว้จะมองเห็นใบด้านในได้
    เยื่อหุ้มเปลือกก็ถูกฉีกขาดอย่างระมัดระวังด้วยตา
    แหนบหรือเข็มแล้วลอกออก พื้นที่ขนาดเล็ก (0,5-1
    ซม. 2) เผยให้เห็นเยื่อหุ้ม chorioallantoic

    5. ติดเชื้อเยื่อหุ้มเซลล์ chorioallantoic
    โดยทาสารที่มีไวรัสในปริมาณ 0.1-0.2 มิลลิลิตร
    (เช่น ไวรัสวัคซีน) โดยใช้ปิเปตของปาสเตอร์
    หรือเข็มฉีดยา

    6. หน้าต่างในเปลือกปิดด้วยยางยืดพิเศษ
    ฟิล์ม แผ่นปิดหมัน หรือแก้ว
    หมวก สำหรับติดกระจกและฝาเข้ากับเปลือกหอย
    ใช้พาราฟินหลอมเหลว

    ตัวอ่อนที่ติดเชื้อจะถูกวางไว้ในเทอร์โมสตัทในตำแหน่งแนวตั้งและฟักเป็นเวลา 2-3 วัน หลังจากนั้นจึงทำการชันสูตรพลิกศพตามกฎต่อไปนี้:

    1. วางไข่ไว้บนขาตั้งเพื่อให้อากาศถ่ายเท
    พื้นที่อยู่ด้านบน สถานที่กำลังถูกฆ่าเชื้อ
    การเปิดที่กำลังจะเกิดขึ้นโดยการประมวลผลที่เหมาะสม
    แอลกอฮอล์และไอโอดีน

    2. หลังจากลอกฟิล์ม แผ่นปิด หรือฝาปิดออกแล้ว
    ใช้กรรไกรปลอดเชื้อตัดเปลือกออกตามแนวขอบอากาศ
    ช่องว่าง.

    3. ใช้แหนบดึงเปลือกออก
    เยื่อหุ้มเซลล์ chorioallantoic ที่ถูกเปิดเผย (ซึ่งอาจ
    ให้เห็นการเปลี่ยนแปลง) ตัดแต่งตามขอบเปลือก ผ่าน
    หลุมที่เกิดขึ้นเทเนื้อหาทั้งหมดของไข่ลงในถ้วย
    หรือถาด

    4. เนื้อเยื่อ chorioallantoic ที่เหลืออยู่ภายในเปลือก
    เปลือกจะถูกเอาออกอย่างระมัดระวังด้วยแหนบแล้วใส่เข้าไป
    ถ้วยฆ่าเชื้อด้วยน้ำเกลือ นี่มันคือ
    ยืดตัวและศึกษาการเปลี่ยนแปลงโดยวางถ้วยไว้ในที่มืด
    พื้นหลัง

    เพื่อให้ได้วัสดุที่มีไวรัสจากเมมเบรน chorioallantoic จะต้องบดด้วยกรรไกร จากนั้นบดในครกด้วยแก้วควอทซ์ โดยเติมน้ำเกลือ ระบบกันสะเทือนที่เกิดขึ้นจะถูกปั่นแยกที่ 2,000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 10-15 นาที และใช้ส่วนเหนือตะกอน! เป็นวัสดุที่มีไวรัส (จำเป็นต้องมีการทดสอบภาคบังคับว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย)

    การติดเชื้อในช่องอัลลันโทอิกวิธีการนี้

    โดดเด่นด้วยความเรียบง่ายและมีคุณค่าเนื่องจากมีส่วนช่วยในการสะสมของไวรัสอย่างมีนัยสำคัญ โดยปกติตัวอ่อนอายุ 10 วันจะถูกนำไปติดเชื้อ ขั้นตอนหลักของการติดเชื้อในโพรงอัลลันโทอิก:

    }. วางไข่ไว้บนขาตั้งโดยให้ปลายทู่หงายขึ้น และเปลือกไข่จะถูกฆ่าเชื้อเหนือช่องอากาศ

    2. ที่กึ่งกลางของปลายทื่อจะมีการเจาะเข้าไปในเปลือกด้วย
    โดยใช้เข็มผ่า

    3. สอดเข็มของกระบอกฉีดยาที่มีสารเจือจางเข้าไปในรู
    ไวรัส (เช่นไวรัสไข้หวัดใหญ่) เข็มกำลังก้าวเข้าสู่
    ทิศทางแนวตั้งต่ำกว่าระดับอากาศ 2-3 มม
    ถุงแล้วฉีดสาร OD-0.2 มล.

    4. รูในเปลือกถูกปิดผนึกโดยใช้
    พาราฟินหมันละลาย

    โดยปกติตัวอ่อนที่ติดเชื้อจะถูกเก็บไว้ในเทอร์โมสตัทเป็นเวลา 2 วัน ก่อนเปิดไข่ ให้นำไข่ไปแช่ในตู้เย็นข้ามคืนที่อุณหภูมิ 4° การเปิดจะดำเนินการตามลำดับต่อไปนี้:

    1. วางไข่บนขาตั้งโดยให้ถุงลมนิรภัยอยู่ด้านบน เปลือกด้านบนจะถูกฆ่าเชื้อ

    2. ใช้กรรไกรตัดเปลือกให้สูงขึ้นเล็กน้อย
    ขอบเขตน่านฟ้า

    3. ค่อยๆ แกะเปลือกออกด้วยแหนบแล้ว
    เหตุใดเมมเบรน chorioallantoic จึงถูกเจาะด้วยปาสเตอร์
    ปิเปตในสถานที่ที่ไม่มีภาชนะและดูดอัลลันโทอิก
    ของเหลว (คุณสามารถเก็บได้ 5-6 มล.)

    4. ของเหลว Allantoic จะถูกถ่ายโอนไปยังที่ปลอดเชื้อ
    หลอดทดลองและบางส่วนถูกฉีดเข้าไปในน้ำซุปเพื่อตรวจสอบ
    ความปลอดเชื้อทางแบคทีเรีย

    วิธีการติดเชื้อโพรงอัลลันโทอิกมักใช้ในการปลูกฝังไวรัสไข้หวัดใหญ่ เช่นเดียวกับคางทูมและวัคซีน

    การติดเชื้อในช่องน้ำคร่ำ

    วิธีนี้ทำได้ยากกว่าและใช้บ่อยน้อยกว่าวิธีก่อนหน้าเล็กน้อย ลักษณะเฉพาะของมันคือเมื่อติดเชื้อไวรัส pneumotropic บางชนิด (เช่นไวรัสไข้หวัดใหญ่, คางทูม) ตัวหลังจะทวีคูณไม่เพียง แต่ในเซลล์ของเยื่อหุ้มน้ำคร่ำเท่านั้น แต่ยังอยู่ในทางเดินหายใจและเนื้อเยื่อปอดของตัวอ่อนด้วยซึ่งของเหลวที่ติดเชื้อ แทรกซึม ตัวอ่อนอายุ 7-12 วันใช้สำหรับการติดเชื้อ การติดเชื้อในช่องน้ำคร่ำจะดำเนินการโดยใช้วิธีเปิด เมื่อมีการสร้างรูที่มีขนาดค่อนข้างใหญ่ในเปลือกเพื่อนำวัสดุเข้าไป หรือวิธีปิด เมื่อติดเชื้อผ่านการเจาะเปลือก

    ครั้งแรกมีบาดแผลมากกว่าส่วนที่สองมีความน่าเชื่อถือน้อยกว่าเนื่องจากการสุ่มสี่สุ่มห้าจึงเป็นไปไม่ได้เสมอไปที่จะสอดเข็มเข้าไปในโพรงน้ำคร่ำ

    เทคนิคการติดเชื้อแบบเปิด:

    1. วางไข่บนขาตั้งและฆ่าเชื้อ
    เปลือกบริเวณปลายทู่

    2. เหนือศูนย์กลางน่านฟ้าในเปลือก
    ใช้กรรไกรตัดหน้าต่างที่มีเส้นผ่านศูนย์กลาง 2 ซม. (เช่น
    สำหรับการติดเชื้อที่เยื่อหุ้ม chorioallantoic)

    3. นำใบด้านในของเปลือกออกอย่างระมัดระวัง
    เมมเบรนโดยใช้แหนบเผยให้เห็นส่วนที่อยู่ข้างใต้
    เยื่อหุ้มเซลล์ chorioallantoic

    ใช้กรรไกรตัดรูเล็กๆ เข้าไป
    เยื่อหุ้ม chorioallantoic ในสถานที่ที่ไม่มีหลอดเลือดและมีการสอดแหนบตาเข้าไปในบาดแผล เยื่อน้ำคร่ำจะถูกจับด้วยแหนบ และถุงน้ำคร่ำจะถูกดึงออกมาเหนือพื้นผิวของเยื่อหุ้มเซลล์ chorioallantoic

    5. จับเยื่อหุ้มน้ำคร่ำในตำแหน่งนี้
    ติดเชื้อในช่องน้ำคร่ำโดยการฉีด 0.1-
    เจือจางไวรัส 0.2 มล.

    6. ปิดรูในเปลือกด้วยฝาปลอดเชื้อ
    หรือครอบกระจกเพื่อใช้ซ่อมและ
    ปิดผนึกไข่ด้วยพาราฟินหลอมเหลว

    ตัวอ่อนที่ติดเชื้อจะถูกฟักเป็นเวลา 2 วัน ส่วนเซลล์ที่ตายแล้วจะถูกทิ้งไปในวันแรก (สังเกตผ่านหน้าต่างในเปลือก) หลังจากเปิดแล้ว ตัวอ่อนจะถูกเก็บไว้ค้างคืนในตู้เย็นที่อุณหภูมิ 4°C

    เทคนิคการเปิดตัวอ่อนขณะติดเชื้อในช่องน้ำคร่ำ:

    1. หลังจากฆ่าเชื้อบริเวณที่จะชันสูตรพลิกศพที่กำลังจะเกิดขึ้นแล้ว ให้ตัดออก
    เปลือกอยู่เหนือขอบถุงลมเล็กน้อย

    2. เยื่อหุ้มเซลล์ chorioallantoic ถูกเจาะ
    ปิเปตปาสเตอร์และเอาของเหลวอัลลันโทอิกออก

    3. ใช้แหนบคีบถุงน้ำคร่ำ
    เมมเบรนด้วยเข็มฉีดยาหรือปิเปตปาสเตอร์และ
    ดูดของเหลวลบความจำเข้าไป (จาก 0.5 ถึง 1.5 มล.) คุณ
    ตัวอ่อนที่ติดเชื้อ ของเหลวควรมีขุ่นในขณะเดียวกัน
    มีลักษณะโปร่งใสเหมือนตัวอ่อนปกติ

    4. ของเหลวที่ถ่ายจะถูกถ่ายโอนไปยังหลอดทดลองที่ปราศจากเชื้อ 0.1-
    เติมเชื้อ 0.3 มิลลิลิตรลงในน้ำซุปเพื่อควบคุมแบคทีเรีย
    ความเป็นหมัน

    จัดทำโดย: ครู Ugysheva S.E.

    สไลด์ 3

    โครงสร้างของไวรัส

    สไลด์ 4

    โครงสร้างของไวรัส A – ไวรัสอย่างง่าย B – ไวรัสเชิงซ้อน

    สไลด์ 5

    ตามระดับความอันตราย ไวรัสแบ่งออกเป็นสี่กลุ่ม: กลุ่มที่ 1: เชื้อโรคของอีโบลา, ลาสซา, มาร์เบิร์ก, ไข้มาชูโป, ไข้ทรพิษ และไวรัสตับอักเสบบี (ลิง) กลุ่มที่ 2: อาร์โบไวรัส, อารีนาไวรัสบางชนิด, ไวรัสพิษสุนัขบ้า, ไวรัสตับอักเสบซีและบี, เอชไอวี

    กลุ่มที่ 3 - ไวรัสไข้หวัดใหญ่, โปลิโอ, โรคไข้สมองอักเสบ, วัคซีน

    กลุ่มที่ 4 - อะดีโนไวรัส, โคโรนาไวรัส, เริมไวรัส, รีโอไวรัส, ออนโคไวรัส

    สไลด์ 6

    สไลด์ 7

    หลักการจำแนกไวรัส ประเภทของกรดนิวคลีอิก โครงสร้าง กลยุทธ์การจำลอง ขนาด สัณฐานวิทยา ความสมมาตรของไวรัส จำนวนของแคปโซเมอร์ การมีอยู่ของซูเปอร์แคปซิด การมีอยู่ของเอนไซม์จำเพาะ โดยเฉพาะ RNA และ DNA POLYMERASES นิวรามินิเดส ความไวต่อสารทางกายภาพและเคมี โดยเฉพาะอีเทอร์ คุณสมบัติทางภูมิคุ้มกัน กลไกการส่งผ่านตามธรรมชาติ Tropism ไปยังโฮสต์ เนื้อเยื่อและเซลล์ของมัน พยาธิวิทยา การก่อตัวของการรวมตัว อาการของโรค

    สไลด์ 8

    การจำแนกประเภทของไวรัส (ประกอบด้วย RNA)

    สไลด์ 9

    องค์ประกอบทางเคมีของไวรัส ไวรัส ได้แก่ กรดนิวคลีอิก โปรตีน ลิพิด ไกลโคลิพิด และไกลโคโปรตีน พวกมันมักประกอบด้วยกรดนิวคลีอิกชนิดหนึ่ง (DNA หรือ RNA) ซึ่งคิดเป็น 1% ถึง 40% ของมวลของ virion จีโนมของไวรัสมีข้อมูลที่เพียงพอสำหรับการสังเคราะห์โปรตีนเพียงไม่กี่ชนิด มวลของมันสูงถึง 10-15 มก. ซึ่งน้อยกว่าเซลล์ 1 ล้านเท่าและมีความยาวมากถึง 0.093 มม. จำนวนคู่นิวคลีโอไทด์มีตั้งแต่ 3150 (ไวรัสตับอักเสบบี) ถึง 230,000 (ไวรัสวาริโอลา) โปรตีนของไวรัส (70-90%) แบ่งออกเป็นแบบมีโครงสร้างและแบบไม่มีโครงสร้าง โครงสร้าง - โปรตีนที่เป็นส่วนหนึ่งของ virions ภายนอกเซลล์ที่เจริญเต็มที่ พวกมันทำหน้าที่สำคัญหลายประการ: - ปกป้องกรดนิวคลีอิกจากความเสียหายภายนอก ทำปฏิกิริยากับเยื่อหุ้มเซลล์ที่ละเอียดอ่อน ตรวจสอบการแทรกซึมของไวรัสเข้าสู่เซลล์ - มีกิจกรรม RNA และ DNA polymerase เป็นต้น ไม่ใช่ส่วนหนึ่งของ virion ที่โตเต็มที่ แต่เกิดขึ้นระหว่างการสืบพันธุ์ โดย: - ควบคุมการแสดงออกของจีโนมของไวรัส - เป็นสารตั้งต้นของโปรตีนของไวรัสที่สามารถยับยั้งการสังเคราะห์ทางชีวภาพของเซลล์ ขึ้นอยู่กับตำแหน่งของพวกมันใน virion โปรตีนจะถูกแบ่งออกเป็น capsid, supercapsid, matrix, โปรตีนหลักและโปรตีนที่เกี่ยวข้องกับกรดนิวคลีอิก ไขมัน (15-35%) มีอยู่ในไวรัสที่ซับซ้อนและเป็นส่วนหนึ่งของเปลือกซุปเปอร์แคปซิดซึ่งก่อตัวเป็นชั้นไขมันสองชั้น พวกเขา: - ทำให้ซองไวรัสมีเสถียรภาพ - ให้การป้องกันชั้นใน

    virions จากสารที่ชอบน้ำของสภาพแวดล้อมภายนอก - มีส่วนร่วมในการลดโปรตีนของ virions

    การสืบพันธุ์ของไวรัส คุณลักษณะของมันคือจีโนมนั้นแสดงโดยทั้ง RNA และ DNA ซึ่งมีโครงสร้างและรูปแบบที่หลากหลาย RNA ของไวรัสเกือบทั้งหมดสามารถจำลองแบบได้อย่างอิสระจาก DNA ของเซลล์ ไวรัสมีวิธีการขยายพันธุ์ที่แยกจากกันโดยธรรมชาติซึ่งประกอบด้วย ความจริงที่ว่าการสังเคราะห์จีโนมและโปรตีนของไวรัสถูกแยกออกจากกันในอวกาศและเวลา: กรดนิวคลีอิกจะถูกจำลองในนิวเคลียสของเซลล์ โปรตีนในไซโตพลาสซึม และการรวมตัวกันของ virions ทั้งหมดสามารถเกิดขึ้นได้บนพื้นผิวด้านในของเยื่อหุ้มเซลล์ไซโตพลาสซึม การสืบพันธุ์ของไวรัสเป็นระบบเฉพาะสำหรับการสร้างข้อมูลแปลกปลอมในเซลล์ยูคาริโอตและรับประกันการอยู่ใต้บังคับบัญชาของโครงสร้างเซลล์อย่างสมบูรณ์ตามความต้องการของไวรัส การสืบพันธุ์ของไวรัสมีหลายขั้นตอน ระยะแรก ๆ ได้แก่ การดูดซับไวรัสบนผิวเซลล์ การแทรกซึม (การเจาะ) เข้าไปในเซลล์ และการถอดเสื้อผ้า (การลดโปรตีน) ระยะสุดท้าย (กลยุทธ์จีโนมของไวรัส) รวมถึงการสังเคราะห์กรดนิวคลีอิกของไวรัส การสังเคราะห์โปรตีน การรวมตัวของไวรัส และการปล่อยอนุภาคของไวรัสออกจากเซลล์

    สไลด์ 12

    การแนบไวรัสกับพื้นผิวเซลล์นั้นมั่นใจได้ด้วยกลไกสองประการ: ไม่เฉพาะเจาะจงและเฉพาะเจาะจง ไม่เฉพาะเจาะจง กำหนดโดยกองกำลัง ปฏิสัมพันธ์ทางไฟฟ้าสถิตซึ่งเกิดขึ้นระหว่างกลุ่มสารเคมีบนพื้นผิวของไวรัสและเซลล์ที่มีประจุต่างกัน กลไกเฉพาะ (การดูดซับแบบย้อนกลับและแบบย้อนกลับไม่ได้) ถูกกำหนดโดยตัวรับไวรัสและเซลล์เสริม อาจเป็นโปรตีน คาร์โบไฮเดรต หรือไขมันก็ได้ ตัวอย่างเช่น ตัวรับไวรัสไข้หวัดใหญ่คือกรดเซียลิก จำนวนตัวรับที่บริเวณดูดซับสามารถมีได้ถึง 3,000 ตัว บนพื้นผิวของไวรัส ตัวรับมักจะอยู่ที่ด้านล่างของช่องและรอยแยก การแทรกซึมของไวรัสเข้าสู่เซลล์เกิดขึ้นผ่านกลไกของ receptor endocytosis (ตัวแปรของ viropexis) ในบริเวณพิเศษของเยื่อหุ้มเซลล์ที่มีบล็อกพิเศษที่มีสูง น้ำหนักโมเลกุล- แคลทริน เยื่อหุ้มเซลล์จะลุกลามและเกิดแวคิวโอลภายในเซลล์ที่เคลือบด้วยแคลทริน มีจำนวนถึง 2,000 แวคิวโอลรวมตัวกันเพื่อสร้างรีเซพโตโซม และแวคิวโอโซมรวมเข้ากับไลโซโซม โปรตีนบนพื้นผิวของไวรัสทำปฏิกิริยากับเยื่อหุ้มไลโซโซมและนิวคลีโอโปรตีนของพวกมันจะถูกปล่อยออกสู่ไซโตพลาสซึม อย่างไรก็ตามมีกลไกอื่นในการแทรกซึมของไวรัสเข้าไปในเซลล์ - การเหนี่ยวนำให้เกิดฟิวชั่นเมมเบรน มันเกิดขึ้นได้ด้วยโปรตีนฟิวชันพิเศษของไวรัส (F- จากฟิวชัน) ผลจากกระบวนการนี้ เปลือกไลโปโปรตีนของไวรัสจะรวมเข้ากับเยื่อหุ้มเซลล์ และจีโนมของมันจะแทรกซึมเข้าไปในเซลล์ โปรตีนดังกล่าวได้รับการระบุในไวรัสไข้หวัดใหญ่, parainfluenza, rhabdoviruses เป็นต้น

    สไลด์ 13

    การเปลื้องผ้าของ virions เป็นกระบวนการหลายขั้นตอน ในระหว่างที่มีการปล่อยเครื่องมือนิวคลีอิกของพวกมัน เปลือกป้องกันที่ยับยั้งการแสดงออกของจีโนมจะหายไป มันเกิดขึ้นในพื้นที่เฉพาะ - ไลโซโซมและอุปกรณ์ Golgi ระยะหลังของการสืบพันธุ์มุ่งเป้าไปที่การสังเคราะห์กรดนิวคลีอิกของไวรัสและโปรตีน กลไกการจำลอง (การก่อตัวของจีโนมของไวรัสซึ่งเป็นสำเนาที่แน่นอนของรุ่นก่อน) ขึ้นอยู่กับลักษณะของกรดนิวคลีอิก คุณ ประเภทต่างๆไวรัสไม่เหมือนกัน การจำลองแบบในไวรัสที่มี RNA เกิดขึ้นตามรูปแบบที่คล้ายคลึงกัน mRNA ถูกสังเคราะห์บน RNA แม่ และ RNA รูปแบบกลางทำหน้าที่เป็นแม่แบบสำหรับการสังเคราะห์จีโนมของไวรัส การถอดเสียงเป็นกระบวนการสร้าง Messenger RNA มันเกิดขึ้นด้วยความช่วยเหลือของเอนไซม์พิเศษที่เรียกว่า RNA polymerase ที่ขึ้นกับ DNA หรือ RNA ไวรัส DNA มีเอนไซม์ที่มีต้นกำเนิดจากเซลล์ ในขณะที่ไวรัส RNA มีทรานสคริปเนสเฉพาะไวรัสของตัวเอง ในขั้นตอนการแปล ข้อมูลทางพันธุกรรมจะถูกอ่านจาก Messenger RNA และแปลเป็นลำดับกรดอะมิโน กระบวนการนี้เกิดขึ้นในไรโบโซม โมเลกุล RNA เคลื่อนเข้าสู่ไรโบโซมตามลำดับรหัสแฝดที่รับรู้โดยการถ่ายโอน RNA หลังมีกรดอะมิโนในพื้นที่พิเศษ

    สไลด์ 14

    สไลด์ 15

    สไลด์ 16

    การเพาะเลี้ยงเชื้อไวรัส เอ็มบริโอไก่ อายุ 6-12 วัน วิธีการติดเชื้อ - เปิด, ปิด

    สไลด์ 17

    การเพาะเลี้ยงไวรัส การเพาะเลี้ยงเซลล์: - การเพาะเลี้ยงตัวอ่อนมนุษย์, ไตลิง, ไฟโบรบลาสต์ของตัวอ่อนไก่ ฯลฯ สามารถเติบโตได้หลายตอนเป็นวัฒนธรรมรอง เซลล์ที่ปลูกถ่ายได้ เป็นการเพาะเลี้ยงเซลล์ที่ได้รับความสามารถในการเติบโตและการสืบพันธุ์อย่างไม่ จำกัด พวกมันได้มาจากเนื้องอกหรือจากเนื้อเยื่อของมนุษย์หรือสัตว์ปกติที่มีคาริโอไทป์ที่เปลี่ยนแปลงไป HeLa (มะเร็งปากมดลูก) Hep-2 (มะเร็งกล่องเสียงของมนุษย์), CV (มะเร็งช่องปากของมนุษย์), RD (มะเร็งกล้ามเนื้อลายของมนุษย์), RH (ไตของตัวอ่อนมนุษย์), Vero (ไตลิงเขียว), SPEV (ไตของตัวอ่อนหมู), VNK- 32 (ไตหนูแฮมสเตอร์ซีเรีย) เซลล์เพาะเลี้ยงเซลล์ซ้ำ; พวกมันเป็นการเพาะเลี้ยงเซลล์ประเภทเดียวกัน มีชุดโครโมโซมซ้ำกัน และสามารถทนต่อวัฒนธรรมย่อยได้ถึง 100 ชนิดในสภาพห้องปฏิบัติการ เป็นรูปแบบที่สะดวกในการเตรียมวัคซีนสำหรับไวรัส เนื่องจากปราศจากการปนเปื้อนจากไวรัสต่างประเทศ คงคาริโอไทป์ดั้งเดิมไว้ระหว่างทาง และไม่มีกิจกรรมก่อมะเร็ง ส่วนใหญ่แล้ว พวกเขาใช้สายการเพาะเลี้ยงที่ได้มาจากไฟโบรบลาสต์ของเอ็มบริโอของมนุษย์ (WI-38, MRC-5, MRC-9, IMR-90), วัว, สุกร, แกะ และอื่นๆ ที่คล้ายคลึงกัน การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกเก็บไว้แช่แข็ง

    สไลด์ 18

    สารอาหารที่ใช้เพื่อสนับสนุนการเพาะเลี้ยงเซลล์หรือการเจริญเติบโตอาจเป็นสารอาหารจากธรรมชาติหรือสังเคราะห์ (เทียม) สื่อธรรมชาติ-ซีรั่มเลือดขนาดใหญ่ วัว, ของเหลวจากฟันผุ, ผลิตภัณฑ์ไฮโดรไลซิสจากนม, ไฮโดรไลเสตต่างๆ (5% เฮโมไฮโดรไลเสต, 0.5% แลคโตอัลบูมิน ไฮโดรไลเสต) หรือสารสกัดจากเนื้อเยื่อ ของพวกเขา องค์ประกอบทางเคมีช่วยสร้างสภาวะที่คล้ายคลึงกับที่มีอยู่ในร่างกายมนุษย์ ข้อเสียที่สำคัญของสื่อดังกล่าวคือลักษณะที่ไม่ได้มาตรฐานเนื่องจากองค์ประกอบเชิงคุณภาพและเชิงปริมาณของส่วนประกอบที่ประกอบขึ้นอาจแตกต่างกันไป สารอาหารสังเคราะห์ไม่มีข้อเสียนี้เนื่องจากองค์ประกอบทางเคมีเป็นมาตรฐานเนื่องจากได้มาจากการรวมสารละลายเกลือต่างๆ (วิตามิน, กรดอะมิโน) ภายใต้สภาวะเทียม สารละลายที่ใช้บ่อยที่สุดเหล่านี้ได้แก่ สื่อ 199 (การเพาะเลี้ยงเซลล์แบบ trypsinized และต่อเนื่อง), สื่อ Eagle (ประกอบด้วยชุดกรดอะมิโนและวิตามินขั้นต่ำ และใช้ในการเพาะเลี้ยงเซลล์แบบ diploid และเซลล์ต่อเนื่อง), สื่อ EagleMEM (การเพาะปลูก ของเซลล์ที่มีความต้องการเป็นพิเศษ) สารละลายแฮงค์ ซึ่งใช้สำหรับสร้างอาหารเลี้ยงเชื้อ ล้างเซลล์ ฯลฯ

    สไลด์ 19

    สไลด์ 20

    สไลด์ 21

    การติดเชื้อในสัตว์ทดลอง สัตว์ทดลองจำนวนมากถูกนำมาใช้กันอย่างแพร่หลายในด้านไวรัสวิทยาเพื่อแยกและระบุไวรัส การได้รับซีรั่มต้านไวรัสที่จำเพาะ ศึกษาแง่มุมต่างๆ ของการเกิดโรคของโรคไวรัส การพัฒนาวิธีการต่อสู้กับโรคและการป้องกัน หนูขาวมักใช้บ่อยที่สุด ที่มีอายุต่างกัน(อายุสองวัน) หนูขาว หนูตะเภา กระต่าย กระรอกดิน หนูฝ้าย ลิง และอื่นๆ

    สไลด์ 22

    มีหลายวิธีในการติดเชื้อในสัตว์ ขึ้นอยู่กับเขตร้อนของไวรัสและภาพทางคลินิกของโรค สามารถฉีดสารทดสอบ: - ผ่านทางปาก - เข้าไปในทางเดินหายใจ (การหายใจ, ผ่านทางจมูก) - ทางผิวหนัง - ในผิวหนัง - ใต้ผิวหนัง, กล้ามเนื้อ - ฉีดเข้าเส้นเลือดดำ - ในเยื่อบุช่องท้อง - ในหัวใจ - เข้าสู่กระจกตาที่มีแผลเป็น - เข้าไปในช่องหน้าม่านตา - เข้าสู่สมอง

    สไลด์ 23

    สไลด์ 24

    สไลด์ 25

    สไลด์ 26

    แบคทีเรีย (ฟาจ) (จากภาษากรีกโบราณ φᾰγω - "ฉันกลืนกิน") เป็นไวรัสที่เลือกแพร่เชื้อไปยังเซลล์แบคทีเรีย ส่วนใหญ่แล้วแบคทีเรียจะขยายตัวภายในแบคทีเรียและทำให้เกิดการสลาย โดยปกติแล้ว แบคทีริโอฟาจประกอบด้วยชั้นเคลือบโปรตีนและสารพันธุกรรมของกรดนิวคลีอิกสายเดี่ยวหรือสายคู่ (DNA หรือที่น้อยกว่าปกติคือ RNA) ขนาดอนุภาคประมาณ 20 ถึง 200 นาโนเมตร โดยเป็นอิสระจาก Frederick Twort นักจุลชีววิทยาชาวฝรั่งเศส-แคนาดา D'Herelle เฟลิกซ์รายงานการค้นพบแบคทีเรียเมื่อวันที่ 3 กันยายน พ.ศ. 2460 นอกจากนี้เป็นที่ทราบกันดีว่านักจุลชีววิทยาชาวรัสเซีย Nikolai Fedorovich Gamaleya ย้อนกลับไปในปี พ.ศ. 2441 ได้สังเกตเห็นปรากฏการณ์การสลายของแบคทีเรีย (บาซิลลัสแอนแทรกซ์) เป็นครั้งแรกภายใต้อิทธิพลของสารที่ปลูกถ่ายได้ วงจรชีวิต แบคทีเรียที่มีอุณหภูมิปานกลางและมีความรุนแรงในระยะเริ่มแรกของการมีปฏิสัมพันธ์กับเซลล์แบคทีเรียจะมีวัฏจักรเดียวกัน การดูดซับของแบคทีเรียบนตัวรับเซลล์ที่จำเพาะต่อฟาจ การฉีดกรดนิวคลีอิกฟาจเข้าไปในเซลล์เจ้าบ้าน การจำลองแบบร่วมของฟาจและกรดนิวคลีอิกของแบคทีเรีย การแบ่งเซลล์ นอกจากนี้แบคทีเรียสามารถพัฒนาได้ตามสองแบบจำลอง: เส้นทาง lysogenic หรือ lytic แบคทีเรียในระดับปานกลางหลังจากการแบ่งเซลล์อยู่ในสถานะการพยากรณ์ (วิถี Lysogenic) แบคทีเรียที่มีฤทธิ์รุนแรงพัฒนาตามแบบจำลอง Lytic: กรดนิวคลีอิกของฟาจควบคุมการสังเคราะห์เอนไซม์ฟาจ โดยใช้อุปกรณ์สังเคราะห์โปรตีนจากแบคทีเรียเพื่อการนี้ ฟาจจะหยุดการทำงานของ DNA และ RNA ของโฮสต์ไม่ทางใดก็ทางหนึ่ง และเอนไซม์ฟาจจะทำลายมันอย่างสมบูรณ์ RNA ของฟาจ "รอง" อุปกรณ์เซลล์สำหรับการสังเคราะห์โปรตีน กรดนิวคลีอิกฟาจจะจำลองและควบคุมการสังเคราะห์โปรตีนชนิดห่อหุ้มใหม่ อนุภาคฟาจใหม่เกิดขึ้นจากการประกอบตัวเองของเปลือกโปรตีน (แคปซิด) รอบกรดนิวคลีอิกของฟาจ ไลโซไซม์ถูกสังเคราะห์ภายใต้การควบคุมของ phage RNA การสลายเซลล์: เซลล์จะแตกออกภายใต้อิทธิพลของไลโซไซม์ มีการปล่อยฟาจใหม่ประมาณ 200-1,000 ตัว ฟาจจะติดเชื้อแบคทีเรียอื่นๆ 1 - หัว, 2 - หาง, 3 - กรดนิวคลีอิก, 4 - capsid, 5 - "ปก", 6 - เปลือกโปรตีนของหาง, 7 - ไฟบริลหาง, 8 - กระดูกสันหลัง, 9 - แผ่นฐาน

    สไลด์ 27

    การติดเชื้อของเอ็มบริโอไก่ เอ็มบริโอไก่ใช้สำหรับเพาะเชื้อไวรัสและไมโคพลาสมา ตัวอ่อนจะใช้เมื่ออายุ 8-14 วัน ขึ้นอยู่กับชนิดของไวรัสและวิธีการติดเชื้อ ไปยังเยื่อหุ้มเซลล์ chorion-allantoic เข้าไปในโพรง allantoic และ amniotic เข้าไปในถุงไข่แดง ก่อนการติดเชื้อ ความสามารถในการมีชีวิตของเอ็มบริโอจะถูกกำหนดโดยการส่องกล้องไข่ และขอบเขตของถุงลมจะถูกทำเครื่องหมายด้วยดินสอบนเปลือก การติดเชื้อของตัวอ่อนไก่จะดำเนินการในกล่องภายใต้สภาวะปลอดเชื้ออย่างเคร่งครัดโดยใช้เครื่องมือฆ่าเชื้อโดยการต้ม เปลือกเหนือช่องอากาศถูกเช็ดด้วยแอลกอฮอล์เผาในเปลวไฟทาด้วยสารละลายไอโอดีน 2% เช็ดอีกครั้งด้วยแอลกอฮอล์แล้วเผา วัสดุไวรัสในปริมาณ 0.05 - 0.2 มล. ถูกนำไปใช้กับเมมเบรน chorion-allantoic ด้วยเข็มฉีดยา tuberculin หรือปิเปตปาสเตอร์ ตัวอ่อนจะถูกผ่าหลังจากการฟักตัวเป็นเวลา 48 - 72 ชั่วโมงในเทอร์โมสตัท พิจารณาการปรากฏตัวของไวรัสในเยื่อหุ้มเซลล์ chrolantoic: 1. โดยจุดทึบแสงสีขาวที่มีรูปร่างต่าง ๆ ; 2. ในปฏิกิริยาฮีแม็กกลูติเนชัน

    สไลด์ 28

    สไลด์ 29

    สไลด์ 30

    สไลด์ 31

    ขอบคุณ!!!

    ดูสไลด์ทั้งหมด

    ไวรัสที่รู้จักส่วนใหญ่มีความสามารถในการสืบพันธุ์ในเอ็มบริโอไก่ (รูปที่ 4) จะใช้ตัวอ่อนอายุตั้งแต่ 8 ถึง 14 วัน ขึ้นอยู่กับชนิดของไวรัส วิธีการติดเชื้อ และวัตถุประสงค์การวิจัย ไวรัสไข้หวัดใหญ่ได้รับการเพาะเลี้ยงใน 9-10 วัน, วัคซีนไข้ทรพิษ - ใน 12 วัน, คางทูม - ในเอ็มบริโอไก่ 7 วัน การสืบพันธุ์ของไวรัสในเอ็มบริโอของไก่เกิดขึ้นใน ส่วนต่างๆเอ็มบริโอซึ่งสัมพันธ์กับลักษณะของเขตร้อนของไวรัส เทคนิคการเพาะไวรัสในเอ็มบริโอไก่ถูกนำมาใช้กันอย่างแพร่หลายในการเพาะปลูกทางอุตสาหกรรม

    โครงสร้างของเอ็มบริโอไก่และวิธีการติดเชื้อ: 1 - เข้าไปในน้ำคร่ำ; 2 - เข้าไปในโพรงอัลลันโทอิก; 3 - เข้าไปในถุงไข่แดง (จุลชีววิทยาและภูมิคุ้มกันวิทยา แก้ไขโดย Vorobyov A.A. - M. - 1999)

    เยื่อหุ้มเซลล์นอกเอ็มบริโอชั้นนอกสุดซึ่งอยู่ติดกับเปลือกหรือเนื้อเยื่อของมารดา จึงเป็นที่แลกเปลี่ยนระหว่างเอ็มบริโอและสิ่งแวดล้อม เรียกว่า คอรีออน.ในสายพันธุ์ที่วางไข่ หน้าที่หลักของคอรีออนคือการแลกเปลี่ยนก๊าซทางเดินหายใจ ในสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม คอรีออนเกี่ยวข้องกับการหายใจและโภชนาการ การขับถ่าย การกรอง และการสังเคราะห์สาร ในสิ่งมีชีวิตดึกดำบรรพ์ คอรีออนเป็นเยื่อหุ้มทุติยภูมิ และในสิ่งมีชีวิตขั้นสูง ถือเป็นเยื่อหุ้มของทารกในครรภ์ ช่องระหว่างคอรีออนและแอมเนียนคือช่องคอริโอแอมนิโอติก

    แอมเนียน(กรีก Amnion) ถุงน้ำคร่ำหรือเยื่อน้ำ - หนึ่งในเยื่อหุ้มตัวอ่อนในตัวอ่อนของสัตว์เลื้อยคลาน นก และสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม

    ตามวิวัฒนาการแล้ว น้ำคร่ำเกิดขึ้นเพื่อปกป้องเอ็มบริโอไม่ให้แห้งในระหว่างการพัฒนานอกสภาพแวดล้อมทางน้ำ ดังนั้น สัตว์มีกระดูกสันหลังที่วางไข่ (สัตว์เลื้อยคลานและนก) รวมถึงสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมที่สืบเชื้อสายมาจากสัตว์เลื้อยคลาน จึงถูกจัดประเภทเป็นน้ำคร่ำ (“สัตว์ที่มีเยื่อหุ้มไข่”) คลาสก่อนหน้านี้และซูเปอร์คลาสของสัตว์มีกระดูกสันหลัง (เซฟาโลคอร์ดาต ไซโคลสโตม ปลา สัตว์ครึ่งบกครึ่งน้ำ) วางไข่ในสภาพแวดล้อมทางน้ำ ดังนั้นจึงไม่จำเป็นต้องใช้เปลือกน้ำ สัตว์ประเภทนี้จะรวมกันเป็นกลุ่มอะนัมเนีย น้ำคร่ำไม่ต้องการสภาพแวดล้อมทางน้ำในการสืบพันธุ์และต่างจากภาวะอะนัมเนีย การพัฒนาในช่วงต้นดังนั้นน้ำคร่ำจึงไม่ติดอยู่กับแหล่งน้ำ นี่คือบทบาทเชิงวิวัฒนาการของแอมเนียน

    ในช่วงที่สัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมกำเนิด เยื่อหุ้มน้ำจะแตก น้ำไหลออกมา และน้ำคร่ำที่หลงเหลืออยู่บนร่างกายของทารกแรกเกิดมักถูกเรียกว่า “เสื้อเชิ้ต” ซึ่งเป็นสัญลักษณ์แห่งความโชคดีและความเชื่อโชคลางอื่นๆ ทุกที่มาตั้งแต่สมัยโบราณ ครั้ง (โดยเฉพาะสุภาษิตรัสเซียเกี่ยวกับผู้ที่ "เกิดในเสื้อเชิ้ต")

    Allantois (จากภาษากรีก allantoeids - รูปไส้กรอก) เป็นอวัยวะระบบทางเดินหายใจของตัวอ่อนของสัตว์มีกระดูกสันหลังชั้นสูง เยื่อหุ้มเซลล์ที่พัฒนาจากส่วนหลังของเอ็มบริโอ นอกจากนี้อัลลันตัวส์ยังเกี่ยวข้องกับการแลกเปลี่ยนก๊าซระหว่างเอ็มบริโอและ สิ่งแวดล้อมและปล่อยของเสียที่เป็นของเหลว อัลลันตัวส์ร่วมกับเยื่อหุ้มตัวอ่อนอื่นๆ ได้แก่ น้ำคร่ำและคอรีออน เป็นลักษณะเฉพาะของสัตว์มีกระดูกสันหลังชั้นสูง เช่น สัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม นก และสัตว์เลื้อยคลาน


    ในนกและสัตว์เลื้อยคลานที่วางไข่ อัลลันตัวส์จะเจริญเติบโตรอบๆ เอ็มบริโอตามผนังเปลือก ในชั้นนอกที่เรียกว่าเมโซเดิร์ม มันสร้างเครือข่ายหลอดเลือดที่กว้างขวางซึ่งมันจะมีปฏิสัมพันธ์ด้วย สภาพแวดล้อมภายนอก- ในสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม อัลลันตัวส์เป็นส่วนหนึ่งของสายสะดือ

    มีหลายวิธีในการติดเชื้อเอ็มบริโอไก่ที่กำลังพัฒนา: บนเยื่อหุ้ม chorioallantoic ในช่องอัลลันโทอิกและน้ำคร่ำ ถุงไข่แดง และร่างกายของเอ็มบริโอ

    การติดเชื้อของเยื่อหุ้ม chorioallantoic ใช้ในการแยกและเพาะเลี้ยงไวรัสที่ก่อตัวเป็นแผ่นโลหะบนเยื่อหุ้มเซลล์ (ไวรัสวัคซีน, ไข้ทรพิษ, เริม) ก่อนการติดเชื้อ ไข่จะถูกตรวจสอบโดยใช้กล้องส่องไข่ และเส้นขอบของช่องอากาศและเยื่อหุ้มเซลล์คอริโออัลลานโตอิกจะถูกร่างด้วยดินสอ พื้นผิวของไข่เหนือช่องอากาศและบริเวณที่เกิดการติดเชื้อจะถูกเช็ดด้วยแอลกอฮอล์เผารักษาด้วยไอโอดีนและทำรูในช่องของถุงลม

    บริเวณที่มีการติดเชื้อ เปลือกจะถูกเอาออกเพื่อไม่ให้เยื่อหุ้มชั้นนอกเสียหาย ซึ่งจะถูกเจาะด้วยเข็มสั้นที่ผ่านการฆ่าเชื้อแล้ว เพื่อไม่ให้เยื่อหุ้มชั้นคอริโออัลลานโตอิกเสียหาย อากาศจากช่องของถุงลมจะถูกดูดออกไป วัสดุไวรัส (0.05 - 0.2 มล.) ถูกนำไปใช้กับเมมเบรน chorioallantoic ด้วยเข็มฉีดยา tuberculin ด้วยเข็มสั้นหรือปิเปตปาสเตอร์ รูในเปลือกหุ้มด้วยแก้วครอบที่ปลอดเชื้อหรือเปลือกที่เลื่อยออกมาชิ้นเดียวกัน และปิดขอบด้วยพาราฟินหลอมเหลว ตัวอ่อนที่ติดเชื้อจะถูกวางในแนวนอนบนขาตั้งและฟักในเทอร์โมสตัท ตัวอ่อนจะถูกผ่าไม่ช้ากว่า 48 ชั่วโมงของการฟักตัว บนเยื่อหุ้มที่ติดเชื้อจะพบจุดทึบแสงสีขาวที่มีรูปร่างต่าง ๆ (โล่)

    การติดเชื้อในช่องอัลลันโทอิก- ไวรัสที่แพร่กระจายเข้าไปในอัลลันโทอิสจะทวีคูณในเซลล์เอนโดเดอร์มอล จากนั้นจึงผ่านเข้าไปในของเหลวอัลลันโทอิก การติดเชื้อจะดำเนินการด้วยวิธีต่อไปนี้: การเจาะจะทำในเปลือกเหนือช่องอากาศด้วยปลายมีดผ่าตัดหรือกรรไกรหลังจากนั้นจึงสอดเข็มที่มีเข็มฉีดยาเข้าไปในรูในแนวตั้งซึ่งผ่านเข้าไปในรู chorioallantoic เมมเบรนและเข้าสู่โพรง allantoic วัสดุจะถูกฉีดในปริมาตร 0.1 มล. และรูที่เต็มไปด้วยพาราฟิน

    การติดเชื้อในถุงไข่แดงเพื่อจุดประสงค์นี้ จะใช้ตัวอ่อนอายุ 5 ถึง 10 วัน ที่พบบ่อยที่สุดคือการติดเชื้อสองวิธี ตามข้อแรก วัสดุจะถูกแนะนำผ่านน่านฟ้า มีการทำรูตรงกลางไข่วางบนขาตั้งโดยให้ปลายทื่อไปทางขวาและสอดเข็มที่ติดกับกระบอกฉีดยาเข้าไปในรูในทิศทางแนวตั้ง โพรงอัลลันโทอิกเข้าไปในไข่แดง สามารถฉีดสารที่มีไวรัสได้ตั้งแต่ 0.1 ถึง 0.5 มิลลิลิตรลงในถุงไข่แดง หลังการติดเชื้อ รูในเปลือกจะเต็มไปด้วยพาราฟิน และวางตัวอ่อนไว้ในเทอร์โมสตัท ตามวิธีที่สองที่ขอบของช่องอากาศด้านข้างที่มีไข่แดงอยู่ (ด้านตรงข้ามกับตัวอ่อน) จะมีการเจาะทะลุในเปลือกซึ่งมีการนำวัสดุติดเชื้อเข้ามา ทิศทางของเข็มควรหันไปทางกึ่งกลางของไข่

    ตัวอ่อนไก่ที่ติดเชื้อไวรัสจะถูกนำไปฟักในตู้ฟักเป็นเวลา 2-3 วัน ขึ้นอยู่กับลักษณะของไวรัสที่แนะนำ สำหรับการพัฒนาไวรัสจากตัวอย่างที่นำมาจากผู้ป่วย (เช่น ผ้าเช็ดโพรงจมูกที่ใช้วินิจฉัยไข้หวัดใหญ่) เอ็มบริโอไก่จะมีสภาพแวดล้อมที่ดี ตามประเภทของการเปลี่ยนแปลงในเนื้อเยื่อของเยื่อหุ้ม chorioallantoic เราสามารถระบุได้โดยตรงว่าเรากำลังเผชิญกับไวรัสชนิดใด ไวรัสไข้ทรพิษและไวรัสเริมทำให้เกิดการเปลี่ยนแปลงที่มีลักษณะเฉพาะอย่างมาก ไวรัสบางชนิดแพร่กระจายอย่างเข้มข้นในเนื้อเยื่อต่าง ๆ ของตัวอ่อนลูกไก่และเป็นวัสดุเริ่มต้นในการเตรียมแอนติเจนของไวรัสที่จำเป็นสำหรับการวินิจฉัยทางห้องปฏิบัติการของโรคไวรัส ไวรัสที่เพิ่มจำนวนในเอ็มบริโอไก่ถูกนำมาใช้เป็นสารตั้งต้นในการได้รับวัคซีนฉีดวัคซีน 18 ชนิด

    แม้ว่าการเพาะเลี้ยงเซลล์จะมีลักษณะเชิงบวกซึ่งแพร่หลายในห้องปฏิบัติการไวรัสวิทยาสมัยใหม่ แต่เอ็มบริโอของไก่ในหลายกรณียังคงรักษาความเป็นอันดับหนึ่งและยังคงทำหน้าที่เป็นวัสดุคลาสสิกในการทำงาน ข้อบ่งชี้ของไวรัสในเอ็มบริโอไก่นั้นเกิดจากการตายของเอ็มบริโอ ปฏิกิริยาการสร้างเม็ดเลือดแดงเชิงบวกบนกระจกที่มีน้ำอัลลันโทอิกหรือน้ำคร่ำ โดยการก่อตัวของรอยโรคโฟกัส (“แผ่นโลหะ”) บนเยื่อหุ้มคอรีออน-อัลลันโทอิก เช่นเดียวกับ ในอาร์เอชเอ